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神经生长因子NGF提取纯化与应用专利资料汇编


1.RGD复合材料神经生长因子缓释性能研究

  主要研究该复合材料的NGF缓释性能,包括体外实验和体内试验两个部分。在体外实验中,分别用酶联免疫吸附试验和PC-12细胞培养法对NGF含量和活性进行检测,以研究材料制备过程对NGF的影响以及RGD复合材料的NGF的释放特性。结果显示:材料制备过程中,因为与乙酸乙酯直接接触,NGF含量会出现48.2%的下降,并伴随活性的减弱;相较于环氧乙烷灭菌,紫外线灭菌能够更好得保护NGF活性,基本不对其造成破坏。体外浸提实验证明:NGF被成功地复合入RGD复合材料,并能够随着复合材料的体外降解而不断释放出来,释放时间达到30天,累计释放量为41.4%,第26天释放的NGF依然能

2.从中华眼镜蛇蛇毒中分离纯化神经生长因子色谱工艺研究

  采用了6种不同的色谱介质进行组合,共设计了5种不同的分离方案对中华眼镜蛇蛇毒NGF进行纯化,实验发现采用DEAE-SepharoseFastFlow阴离子交换层析与SephadexG50凝胶过滤层析联用的两步色谱法可以从蛇毒中得到纯度可达药用标准的目标产品。此工艺较传统方法具有分离速度快、工艺简单、可线性放大的特点。色谱条件优化实验确定阴离子的色谱条件为:洗脱流速0.5mL/min,洗脱液A为0.05mol/LPBS,pH8.5,洗脱液B为0.25mol/LNaCl+0.05mol/LPBS,pH8.5,洗脱程序为等度洗脱+线性梯度洗脱+等度洗脱的淋洗方式。凝胶过滤层析的色谱条件为:洗脱流速0.9m

3.广西眼镜蛇毒神经生长因子的亲和层析分离与其抗肿瘤作用

  用亲和层析分离法从广西眼镜蛇毒中纯化神经生长因子,以期缩短NGF的纯化周期,提高NGF得率;并探讨NGF对人肿瘤细胞的生长抑制作用。方法:(1)粗蛇毒采用SephadexG75凝胶过滤及CMSepharoseCL-6B阳离子交换柱进行分离纯化;用双相免疫扩散法和PC12细胞测定各洗脱峰的活性,再用SDS-PAGE鉴定有NGF活性的洗脱峰的纯度和相对分子质量。(2)取达电泳纯的NGF免疫家兔获得抗血清,用硫酸铵沉淀法初步纯化抗血清IgG,再用HiTraprProteinAFF柱进一步纯化,将纯化的IgG与:CNBr-aw偶联,采用亲和层析法对广西眼镜蛇毒N

4.广西眼镜蛇蛇毒神经生长因子的分离纯化与NGF基因的真核表达

  从广西眼镜蛇蛇毒中分离纯化神经生长因子,并测定其纯度和活性;克隆编码成熟NGF的cDNA序列,构建其真核表达载体pcDNA_((3.1(-))-NGF,并在哺乳动物细胞NIH3T3中进行表达。方法:采用SephadexG-75柱层析和CMSepharoseCL-6B阳离子交换柱层析从广西眼镜蛇蛇毒中分离纯化神经生长因子,洗脱峰各管对抗NGF抗体进行双向免疫扩散,收集免疫反应阳性峰。用SDS-PAGE、PC12细胞分别进行纯度鉴定和活性测定。用Trizol试剂从眼镜蛇毒腺中提取总RNA,采用RT-PCR的方法逆转录合成第一链cDNA,并根据广西眼镜蛇cDNA序列和表达载体的特征设计和合成上下

5.牛脑海马NGF的分离纯化/鉴定与微量元素的测定

  NGF具有多种营养性生物学效应:对胚胎发育期神经元的作用;促进生后发育神经元的生长;维持成熟神经元的存活;促进神经损伤的修复与再生;对神经变性性疾病的作用;对肿瘤的潜在性治疗作用;在炎性疾病中的作用;在糖尿病周围神经病变中的治疗作用。目前,NGF的主要来源是小鼠的颌下腺、蛇毒、豚鼠前列腺、牛精液等,临床较多的采用小鼠颌下腺、蛇毒来源以及基因工程产品人重组NGF(rhNGF),其对人的神经组织有明显的作用,国内外文献已有很多报道。人体的微量元素有70种,根据其作用分为人体必需微量元素和非必需微量元素及人体有害微量元素二类。所谓必需微量元

6.神经生长因子对骨折愈合影响的研究

  探讨神经生长因子对骨折愈合的影响,以及对骨形态发生蛋白-2诱导成骨的作用。方法:昆明小鼠60只随机分为四组,每组15只。建立股骨中段不稳定软骨内成骨骨折模型,A组为实验组,B组为阳性对照组,C组为协同组,D组为阴性对照组,骨折断端局部分别使用NGF+生理盐水(NS)、BMP-2、BMP-2+NGF、NS。四组分别于术后第14、21和28天采用颈椎脱臼法各处死5只小鼠,并于骨折部位取材。处死小鼠前取小鼠眼球的球后动静脉血液,试管盛住。所取标本进行放射学、生化和组织学检测。图像经LEICAQWinLive病理图像分析仪分析,数据采用SPSS13.0统计软件,进行随机设计方差分析

7.神经生长因子缓释微球/神经干细胞联合治疗老年性痴呆的研究

  寻找有效的AD治疗方法已成为当今医学界的紧迫课题。基底前脑胆碱能神经元的营养匮乏或者丢失是AD的一个重要病理变化。神经营养因子能够很好地阻止或者减少神经元的营养匮乏或者丢失;在众多的神经营养因子家族中,神经生长因子是最典型的,迄今为止研究最深入的神经营养因子。基底前脑中胆碱能神经元表达低亲和力的p75~(NTF)和TrkA受体,神经生长因子通过这些受体来提高基底前脑胆碱能神经元的功能,神经生长因子已被广泛地应用于老年性痴呆的实验性治疗。神经生长因子是大分子蛋白类物质,很难透过血脑屏障;生物半衰期很短。将神经生长因子成功

8.神经生长因子缓释微球的研制与体外特性的初步研究

  以牛血清白蛋白(BSA)为模型蛋白,乳酸/羟乙酸共聚物(PLGA)为载体,通过优化空白微球的制备工艺,为制备神经生长因子缓释微球奠定基础;2.探索通过改良的复乳溶剂挥发法制备神经生长因子缓释微球,并考察其一般性质和体外释药特征,从而为以后靶向治疗脊髓损伤的动物实验和临床研究打下了坚实的基础。方法1.采用复乳溶剂挥发法制备BSA-PLGA微球,通过激光粒度分析仪以及扫描电镜考察其表观形态及粒径,采用BCA(二喹林甲酸)微量蛋白测定法测定微球的蛋白含量并计算包封率和载药量,恒温摇床缓释法进行体外释放,测定微球24h释放率,以包封率、载药量、粒径及2

9.神经生长因子微囊的制备与促进周围神经缺损修复的研究

  在神经损伤治疗之中,对于靶组织持续提供神经营养蛋白是非常有价值的治疗方法。我们在此研究了通过神经再生导管室内注入持续释放的神经生长因子微囊是否会增加周围神经的再生能力。2、实验方法:用多聚乳酸研制出神经生长因子微囊,并测定出微囊的特性。然后将包含NGF微囊注入聚乳酸管中,从而可以提供长时间的特异位点的NGF的释放。导管被用在一大鼠的坐骨神经模型中将一个10mm的裂隙连接。移植后三个月,行肌电图检查及形态学分析。3、实验结果:术后三个月聚乳酸导管/神经生长因子微囊组在神经传导速度及形态学中的再生纤维直径、纤维数、纤维密度

10.眼镜蛇毒神经生长因子的提取与抗PC12细胞凋亡的研究

  研究从眼镜蛇毒分离的NGF是否有抗β-淀粉样蛋白致凋亡的作用并探讨可能的机制。通过应用TrkA受体信号通路激酶的特异阻断剂、检测caspase-3的活性及Bcl-2表达的变化,着重探讨NGF抗β-淀粉样蛋白致PC12细胞凋亡作用的相关信号转导通路,为阐明AD的发病机理及其预防和治疗提供实验依据。方法(1)应用Sephadex-G50凝胶层析、CM-SepharoseFF阳离子交换层析及SephacrylS-200HighResolution柱层析从中华眼镜蛇粗毒中分离纯化NGF,以PC12细胞生物活力测定为跟踪检测手段;应用SDS-PAGE和IEF-PAGE分别测定纯化NGF的分子量和等电点

11.载NGF的PLGA纳米粒制备工艺的优化与特性研究

  不同种属的动物体中分离出的NGF具有高度同源性,动物源性的NGF同样适合人类使用,因此NGF将会成为治疗CNS疾病最有潜力的药物之一。但是,由于血脑屏障的存在使得NGF在临床应用中受到很大限制。早期临床治疗当中采取的脑室内注射的给药方式虽然有效,但势必会增加病人的痛苦和感染风险。而且由于NGF半衰期短、以及脑脊液回流等原因,致使药物很难在脑内保持有效浓度,药物利用率非常低。因此寻找一种技术来提高血脑屏障对NGF的通透性,增加NGF在脑内作用的持久性是NGF成功用于临床治疗的关键。近年来,随着纳米医药技术的发展,不断有文章报导利用纳米

12.针刺和神经生长因子治疗脑性瘫痪的机理研究

  研究内容和方法:1、8窝7d龄体重12g新生SD幼鼠按区组随机分为①正常组②假手术组。余下幼鼠造模,建立HIBD幼鼠CP模型。成功模型按区组随机分为③模型组,④单纯针刺组,⑤针刺+NGF组。2、按计划对实验幼鼠进行干预及检测体重、悬吊试验、斜坡试验和Y迷宫试验。3、术后18天取材,用荧光定量PCR(SYBRGreenI染料法)检测其脑组织BCL-2、BAX、Casp3基因mRNA表达;用HE染色法观察其海马组织病理形态学改变;计数正常神经细胞数目;用TUNEL法检测其脑细胞凋亡情况。结果:1、脑组织大体:造模后存活的36只SD幼鼠中,33只出现翻身不能,平衡异常和左旋,造模成功

13、用新复性方法制备重组人神经生长因子
14、一种新多肽——人神经生长因子和编码这种多肽多核苷酸
15、一种测定神经生长因子生物活性方法
16、用酵母分泌表达重组人神经生长因子
17、重组人神经生长因子作为制备治疗癌症化疗药物性周围神经病药物新用途
18、治疗糖尿病合并周围神经病变并发症蛇毒酶神经生长因子
19、神经生长因子类似物(2S,4S)-2-(2’-取代基)-4-(吲哚-3-次甲基)-5...........
20、神经营养因子-3- 一种与神经生长因子和脑衍生神经营养因子有关新神经营养因子
21、应用BDNF/NT-3/NGF分子族成员治疗运动神经元疾病方法
22、降糖药/盐酸消旋山莨菪碱/维生素B12/神经生长因子在制备治疗糖尿病联合药物中应用
23、去白蛋白神经生长因子制剂
24、一种测定制剂中神经生长因子含量方法
25、抗NGF抗体用于治疗各种疾病
26、高效神经生长因子生物胶与其制备和使用方法
27、神经生长因子外用药剂与其制备方法
28、通过施用神经生长因子拮抗剂治疗手术后疼痛方法与包含其组合物
29、NGF拮抗剂和****样药剂在治疗疼痛中用途
30、抗NGF抗体与其使用方法
31、中华眼镜蛇神经生长因子cDNA/克隆和表达
32、一种神经生长因子口服胶囊制备方法
33、神经生长因子在制备治疗抑郁症药物中应用
34、神经生长因子在制备有效减轻体重药物中应用
35、神经生长因子在制备治疗持续性植物状态药物中应用
36、神经生长因子在制备治疗有机磷农药中毒所致迟发性神经病药物中应用
37、TNF NGF超家族受体和可溶性寡聚TNF NGF超家族受体调节剂
38、神经生长因子(NGF)脂质体
39、神经生长因子蛋白含量测定方法与其应用
40、通过施用神经生长因子拮抗剂和NSAID和含有它们组合物治疗疼痛方法
41、作为选择性NGF途径抑制剂人抗NGF中和抗体
42、用有机溶剂病毒灭活法制备鼠神经生长因子工艺
43、神经生长因子制品在制备治疗视神经病变药物中应用
44、重组人神经生长因子酵母表达系统与制备重组人神经生长因子方法
45、测定神经生长因子含量方法
46、TNF NGF受体家族和其它蛋白质受体功能调节剂
47、神经生长因子产生抑制剂/以与配合有该神经生长因子产生抑制剂皮肤外用剂/化..........
48、通过施用神经生长因子拮抗剂治疗骨癌痛方法
49、转铁蛋白(Tf)-神经生长因子(NGF)偶联物制备方法
50、一种神经生长因子注射剂
51、一种适于规模化生产小鼠神经生长因子纯化方法
52、与胶原特异结合神经生长因子与其编码基因与应用
53、针对NGF特异性结合成员
54、通过给予神经生长因子拮抗剂与其组合物来治疗骨关节炎疼痛方法
55、作为长效止痛剂能抑制NGF与TrkA受体结合分子
56、神经生长因子在制备治疗病理性近视药物中应用
57、鹿茸神经生长因子(DEER NGF)提取与其制备方法
58、神经生长因子基因定位改造动物与其制备方法和应用
59、大脑组织液/神经生长因子在制备治疗小儿脑瘫联合药物中应用
60、鼠神经生长因子制备方法和注射用鼠神经生长因子制备方法
61、抗鼠神经生长因子(NGF)多克隆抗体制备方法与其应用
62、一种半定量检测NGF含量胶体金试纸与其制备方法
63、抗人神经生长因子高亲和力人抗体
64、神经生长因子偶联物与其用途
65、一种神经生长因子海绵剂与其制备方法
66、与层粘连蛋白结合神经生长因子与其编码基因与应用
67、神经生长因子病毒灭活方法
68、抗NGF抗体用于治疗各种疾病
69、人源化抗-NGF抗体
70、针对NGF适体与其用途
71、一种适于规模化生产眼镜蛇蛇毒神经生长因子纯化方法
72、基于昆虫杆状病毒表达系统重组人神经生长因子制备方法
73、人脐带间充质干细胞表达人.Sβ-神经生长因子与分离纯化方法
74、作为选择性NGF途径抑制剂人抗NGF中和抗体
75、促进人神经生长因子苯酚衍生物
76、在真核细胞中表达神经生长因子基因构建物制备方法
77、利用天然神经节苷脂或其衍生物来稳定并维持神经生长因子生物学活性
78、从蛇毒中分离纯化神经生长因子方法
79、神经生长因子生产技术
80、神经生长因子制备方法
81、绒毛/蜕膜制人神经生长因子方法
82、TNF NGF超家族受体和可溶性寡聚TNF NGF超家族受体调节剂
83、NGF稳定化制剂
84、一种制备神经生长因子方法
85、一种从蛇毒中提取神经生长因子方法
86、作为疫苗佐剂神经生长因子
87、鼠神经生长因子制备方法
88、蛇毒酶神经生长因子
89、一种从蛇毒中纯化神经生长因子方法
90、一种直接从粗蛇毒中富集神经生长因子方法
91、神经生长因子在治疗有机溶剂中毒性周围神经病中新用途
92、TNF NGF受体家族和其它蛋白质受体功能调节剂
93、TWB 神经生长因子药物制剂



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